在生物医疗检测中,样本中存在的内源性抗体类物质(如类风湿因子(RF)、人源化抗体(HAMA)、异嗜性抗体等)可能会干扰到检测过程,导致临床结果出现偏差。为了有效减少这种干扰,主动添加适当的阻断剂显得尤为重要。这些阻断剂能够显著降低假阳性或假阴性结果的发生率,从而提高检测系统的准确性、灵敏度以及稳定性。
主动阻断剂含有高亲和力的成分,可以与干扰抗体进行结合,有效阻断其与检测抗体或捕获抗体的结合。相比之下,被动阻断剂通常是动物IgG,通过与检测系统中的抗体竞争结合干扰抗体以减少其干扰效果,其使用浓度较高,以提高竞争优势。此外,复合型阻断剂虽然以化学交联的方式将单体IgG聚合为大分子聚合物,但也同时通过空间位阻效应显著增强了阻断效果。
特定的IgG/RF吸附剂能够通过与血清中IgG形成免疫复合物,利用免疫复合物与变性IgG的结构相似性,有效吸附RF,进而显著提高lgM检测的灵敏度和特异性。
阻断剂使用建议:
一、阻断剂的最终工作浓度应通过梯度实验进行确定。首次使用时建议从较高浓度开始,观察效果后再逐步稀释至较低浓度,以选择更合适且经济的使用浓度。
二、阻断剂的使用原则是:尽可能在样本接触之初就添加,并延长其作用时间。
三、在免疫侧向层析法中,建议将阻断剂添加至标记物垫或样品垫处理液中;对于酶免试剂盒或化学发光试剂盒,建议将阻断剂加入磁珠液或酶标液中;而在免疫比浊产品中,建议将其加入R1工作液中。
四、在条件允许的情况下,建议测试多种阻断剂,以寻找最适合的产品;由于不同检测目的和系统的多样性,当单一阻断剂的效果不能完全满足要求时,建议考虑组合使用。有实验结果表明,阻断剂的协同组合能带来更好的效果。
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