金年会金字招牌诚信至上的人单核细胞白血病细胞THP-1是研究细胞生物学和药物筛选的重要工具。以下是关于THP-1细胞的详细生长特性和培养说明。
1. 细胞生长特性
人单核细胞白血病细胞THP-1为圆形悬浮细胞,适合使用无血清冻存液进行冻存,其培养体系为1640基础培养液添加10% FBS、0.05 mM β-巯基乙醇和1%双抗。在传代时,首次建议采用1:2的比例,并且每2至3天更换培养液。
2. 收到细胞后的处理
收到细胞后,应立即按以下方式进行处理:首先使用75%酒精喷洒细胞瓶消毒,然后在超净台内进行严格的无菌操作。将细胞瓶放入37°C、5% CO2的培养箱中静置3-4小时,以便细胞状态稳定。显微镜下观察细胞生长情况,拍取不同倍数的照片(推荐40x、100x、200x各一张)以备后续参考。前三天的照片为重要的售后依据,不提供照片则默认收到状态良好。
3. 细胞培养步骤
在进行细胞传代时,如果细胞的汇合度未超过80%,需将培养液收集至离心管中,保留5ml完全培养基,并放入37°C、5% CO2的孵箱中培养。如果细胞密度超过80%,即可进行传代。具体步骤如下:
a. 对于悬浮细胞,传代可采用以下方法:
方法一:在1000 RPM离心8-10分钟后弃去上清液,补加1-2ml培养液后轻轻吹匀,然后按1:2至1:5的比例将细胞悬液分到新的培养皿或瓶中。
方法二:若选择半数换液,弃去一半的培养基后,将剩余细胞悬起,并按1:2至1:3的比例分至新的培养皿中。
b. 细胞冻存:细胞生长覆盖培养瓶的80%时,将悬液收集,离心后弃上清,沉淀细胞加入1 ml的无血清冻存液,混匀后转移至冻存管,最后将细胞置于-80°C的冰箱中。
c. 细胞复苏:从液氮中取出冻存管,快速解冻后用75%酒精消毒,随后将细胞转移到含5ml培养基的离心管中,离心后重悬并接种至T25培养瓶中,放于37°C、5% CO2的培养箱中继续培养。
4. 售后服务说明
我们重视客户的反馈,以下是细胞问题可重发和不予重发的情况:
1) 可重发情况:
- 运输过程中出现细胞丢失、瓶身破损或培养液漏液等问题。
- 收到细胞出现污染,并在48小时内提供真实实验结果。
- 常温发货细胞在静置24小时后或干冰发货细胞复苏24小时后大部分细胞未存活。
- 合同约定的细胞状态不佳。
2) 不予重发情况:
- 客户造成污染或不当操作。
- 使用非推荐的细胞培养体系导致的问题。
- 未在规定时间内提供细胞状态照片等。
我们在售后服务中始终秉持金年会金字招牌诚信至上的理念,确保提供优质的产品和服务。