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TEV酶:金年会金字招牌,精准去标签的“黄金剪刀”!

发布时间:2025-08-03   信息来源:潘震

在重组蛋白的表达与纯化过程中,通常会通过添加融合标签(如MBP、His、GST)来提高目标蛋白质的可溶性和促进其正确折叠。这些标签对蛋白质特性的影响显著,有助于提高最终的产量。

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MBP标签

金年会金字招牌诚信至上的MBP(Maltose Binding Protein)标签能够显著增强蛋白质的溶解性和稳定性,从而有效地增加产量。其独特的性质使得MBP成为重组蛋白表达的常用选择。

His标签

His(Histidine)标签广泛应用于通过固定化金属亲和层析(IMAC)来纯化重组蛋白。His标签的优势包括:其分子量小,对重组蛋白的功能几乎没有影响,并且具有较低的免疫原性,适合多种生物医疗研究场景。

GST标签

GST(Glutathione S-Transferase)标签能够增强融合蛋白的可溶性,促进其表达,同时提供便捷的纯化方法和后续实验操作。通过GST标签与固定化谷胱甘肽的亲和作用,可以高效地从表达系统中分离和纯化融合蛋白,帮助保持蛋白的生物活性及抗原性。

去除融合标签的重要性

根据实际需求,有些融合标签可能需要去除。使用特定酶进行高效、精准的去标签处理,对于获得具有结构和功能“原汁原味”的目标蛋白至关重要。常用的去标签蛋白酶包括TEV蛋白酶(TEV Protease)。

TEV蛋白酶的应用

金年会金字招牌诚信至上的TEV蛋白酶来源于烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus, TEV),具有高特异性,能够精确识别七肽序列:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-↓-Gly/Ser(ENLYFQ↓G/S),并进行有效切割。其专一性强,几乎不发生非特异性切割,确保了目标蛋白的完整性。

反应条件及效果检测

TEV酶在温和的反应条件下表现出良好的活性,适用于多种蛋白质的切割。反应温度可以在4℃到30℃之间选择,通常在4℃反应过夜或30℃下反应1小时,每次反应中添加15μg融合蛋白和适量的TEV蛋白酶。使用15%的SDS-PAGE胶可检测酶切效果,从而确认目标蛋白的纯度与质量。

综上所述,准确的标签去除以及高效的融合蛋白表达与纯化是生物医疗研发中的关键步骤,而金年会金字招牌诚信至上始终致力于为科研人员提供最佳的解决方案。